13860پ

كارشناسي ارشد

زيست شناسي بيوشيمي

تهران شرق

1399

1/5/99

صحافي شد ندارد

پايان نامه چاپي ندارد

رضا حاجي حسيني

آزاده رسولي

دانشگاه پيام نور تهران شرق

سپسيس يك وضعيت تهديدكننده زندگي است كه توسط پاسخ بدن به عفونت ممكن است ايجاد شود. در واقع واكنش سيستميك بدن به ميكروارگانيسم هاي مهاجم از جمله باكتري ها و قارچ ها مي باشد.سپسيس يكي از جمله بيماري هايي است كه بيماران بستري در بخش مراقبت هاي ويژه ممكن است به اين بيماري مبتلا شوند.اين بيماري به عنوان متداول ترين علت براي اكثر بيماري هاي عفوني و مرگ و ميردر ميان بيماران با وضعيت بحراني به شمار آيد. آنزيم ميلوپراكسيداز يكي از اعضاي خانواده آنزيمي هم پراكسيداز مي‌باشد كه مي‌تواند نقش بسيار مهمي را در فرآيندهاي التهابي و استرس اكسيداتيو ايجاد كند. اين آنزيم در مقادير زيادي در گرانول‌هاي نوتروفيل‌ها يافت مي‌شود. منابع اصلي توليد آن در پلاسما، نوتروفيل‌ها و مونوسيت‌هاي فعال شده مي‌باشد. يك آنزيم مهمي است كه توسط سيستم ايمني براي خنثي كردن باكتري‌ها و ساير ميكروارگانيسم‌ها استفاده مي‌شود. داروهاي ضدالتهابي غيراستروئيدي داراي اثرات آنتي‌اكسيداني و ضدالتهابي هستند كه موجب كاهش درد، التهاب و تب مي‌شوند و امروزه اين داروها نقش بسيار مهمي را در درمان سپسيس ايفا مي‌كنند ولي با توجه به عوارض جانبي ناشي از مصرف اين داروها، امروزه استفاده از داروها با منشا گياهي مورد توجه محققان قرار گرفته است. در اين تحقيق از كنجاله سويا براي توليد پپتيدهاي زيست‌فعال توسط باكتري لاكتوباسيلوس سوبتليس استفاده شده و همچنين بررسي بيان ژن ميلوپراكسيداز در اين تحقيق طي سه مرحله به شرح زير انجام شده است: 1-انجام تخمير فاز جامد جهت توليد پپتيدهاي زيست‌فعال: در اين مرحله پس از كشت باكتري و استريل كردن سويا با مقدار معيني آب، ميزان مشخصي از باكتري به كنجاله سويا تلقيح شده و انكوباسيون انجام مي‌شود. 2-ايجاد مدل التهابي CLP: در اين روش، پس از بيهوش كردن رت‌ها (موش‌ها)، در ديواره شكمي آنها به اندازه 2 سانتي‌متر برش ايجاد مي‌گردد. سپس سكوم خارج شده و بخش سكوم تا زير دريچه بخيه زده شده و در سكوم آنها 2 سوراخ توسط نيدل ايجاد مي‌گردد. بعد از اين مرحله، روده به داخل محفظه شكمي برگردانده شده و پوست و صفاق بخيه زده مي‌شود. 3- تيمار حيوانات و نمونه‌گيري: در اين تحقيق، از 60 عدد رت نر بالغ استفاده گرديده حيوانات به 5 گروه تقسيم شدند: 1-گروه كنترل: بدون عمل جراحي و تيمار 2- گروه لاپاراتومي )Laparatomy(: انجام جراحي لاپاراتومي 3- گروهCLP: جراحي CLP 4-گروه تيمار: جراحي و بلافاصله تيمار رت‌ها با غذاي استاندارد همراه با غذاي تخمير شده به مقدار 5، 10 ، 20% به صورت تزريقي روزي دو بار و سپس رت‌ها 48 ساعت پس از جراحي كشته شده و بافت ريه آنها به منظور بررسي هاي بيوشيمي جدا گرديدند. 5-اندازه گيري فعاليت ميلوپراكسيداز به عنوان پارامتر دخيل در آسيب ريه، و بررسي بيان ژن ميلوپراكسيداز با روش PCRريل تايم القاي سپسيس باعث افزايش آنزيم MPO و بيان ژن MPO شد .(P<0.05) يعني القاي سپسيس باعث افزايش MPOنسبت به گروه كنترل و لاپاراتومي شد. مصرف خوراك تخميري توانست ميزان آنزيم و بيان ژن MPO را نسبت به گروه هاي كنترل و لاپاراتومي كاهش دهد. پس مي توان نتيجه گرفت كه سوياي تخميري مي تواند باعث كاهش آسيب هاي بافت ريه ناشي از سپسيس شود و به عنوان يك دارو با منبع طبيعي مورد استفاده قرار بگيرد.

66547