783پ

Transient expression of Hydrophobin an​d BMP2 fusion protein in tobacco plants

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

دانشگاه پيام نور تهران شرق

1394

76ص.

احساني ، پرستو

ابراهيمي ، محمدعلي

62-65

Gene transmission, Recombinant proteins, Transient expression

در چند سال اخير روشهاي مختلف انتقال ژن به گياهان گسترش يافتهاند كه انتقال ژن به واسطه Agrobacterium به دليل برتري الگوي الحاق ژن، سادگي و كم هزينه بودن آن متداول ترين روش براي انتقال ژن به گياهان به ويژه گياهان دو لپه است. در ميان روش هاي بيان موقت ، از اگروباكتريوم بيشتر از ساير موارد استفاده شده است به طوري كه امكان توليد تركيبات پروتئيني پيچيده را مي دهد . 2BMP مانند ساير پروتئين هاي مورفولوژيكي استخوان، نقش مهمي در توسعه استخوان و غضروف دارد و مي تواند براي درمان نقص استخواني به كار رود. در اين تحقيق همراه شدن دو پروتئين hydrpphobin و BMP2 براي افزايش بيان و نيز تخليص بهتر پروتئين پيش بيني شده است روش ها: -1 ترانسفورم كردن پلازميد PTRAKC-ERH به Ecoli top10 2- هضم آنزيمي و كلونينگ سازه 2bmp به همراه هيدوفوبين كه در پلازميد riptpblue sc قرار دارد به داخل پلازميد ptrakc-erh در باكتري Ecoli top10 . 3 - sequencing و انتقال وكتور ptrakc-erh به اگرو باكتريوم و بررسي حضور وكتور. 4 اگرو اينفيلتريشن در برگ گياه تنباكو و تهيه عصاره گياهي به مقدار كافي با روش - Aqueous two phase system . 5 بررسي حضور ژن در گياه تنباكو ) - RT-PCR ) 6 بررسي حضور پروتئين - SDS PAGE . هدف توليد واستخراج bmp2 بيان شده از گياه تنباكو با استفاده از هيدروفوبين مي باشد . اميد است كه در تحقيقات آتي با بهينه كردن سيستم ، ميزان توليد اين پروتيين را براي كاربردهاي تحقيقاتي و درماني افزايش داد.

1395/8/18

38558