پ.م.ك.409

Regeneration of haploid plants in Brassica napus through microspore embryogenesis review

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي

مركز كرج

92

01/04/92

عالي

95ص.

عنايتي شريعت پناهي، مهرداد

ابراهيمي، محمدعلي

ص:87-95

پ استاد راهنما عنايتي شريعت پناهي، مهرداد , پ استاد مشاور ابراهيمي، محمدعلي

در اين پژوهش با استفاده از دو هيبريد كلزايBrassica napus (Hyola 401 ، Hyola 420 ) و دو رقم تجاري NK octans, و NK karibic سعي شده¬است پروتكل باززايي جنين¬هاي بدست آمده از كشت ميكروسپور توسعه يافته و بهترين گزينه مورد آزمايش در اين راستا معرفي گردد. براي جنين¬زايي، ميكروسپورها در محيط NLN-13 حاوي 13 درصد ساكاروز كشت شدند، و جنين¬هاي بدست آمده براي تست باززايي مناسب در محيط¬هاي پايه مختلف شامل B5 و MS با مقادير متنوع كربوهيدرات و تنظيم كننده رشدي كشت شده، سپس يك دوره سرماي ℃4 به مدت 10 روز در شرايط تاريكي تحمل¬كرده، بعد به فيتوترون با دماي ℃25 منتقل شدند. به منظور افزايش سطح پلوئيدي طوقه و ريشه¬هاي گياهچه¬هاي هاپلوييد حاصل از جنين هاي نرمال در محلول كلشي¬سين (g/L4/3) به مدت 5/1 ساعت قرار گرفتند. با توجه به آزمايشات صورت گرفته مشخص شد اثرات انفرادي ژنوتيپ و محيط و همچنين اثرات متقابل آنها معني دار بوده است. ژنوتيپ Hyola 401 پاسخ پذيرترين و ژنوتيپ NK karibic سخت پاسخ ده ترين در بين ژنوتيپ ها بودند. بهترين محيط براي باززايي و غلبه بر جنين¬زايي ثانويه انتقال جنين¬هاي لپه¬اي شكل به محيط GA31/0% + ساكارز 2 % + Ms(1/2Macro) تعيين شد. با بهينه سازي صورت گرفته، در ژنوتيپ هاي Hyola 401 ، Hyola 420 و NK octans افزايش راندمان توليد گياهان نرمال هاپلوئيد معني دار شد.

28/06/95

كشت كار، زهرا

34551