پ.م.ك.361

Cloning an​d molecular characterization of paramyosin gene of Echinoccus granulosus isolated from Iranian sheep

كارشناسي ارشد

بيوتكنولوژي كشاورزي

مركز كرج

90

20/04/90

عالي

90ص.

بخشي خانيكي، غلامرضا

اسمعيلي زاده، مجيد

ص:88-90

پ استاد راهنما بخشي خانيكي، غلامرضا , پ استاد مشاور اسمعيلي زاده، مجيد

پاراميوسين يك پروتئين ميوفيبريلي در ماهيچه بي مهرگان مي باشد كه داراي وزن مولكولي حدود 97 كيلودالتون مي باشد توالي كامل يا قطعاتي ار اين ژن براي برخي از كرم هاي حلقوي تعيين شده است كه براي انسان پاتوژنيك هستند. ساختار ژن پاراميوسين سه ارگانيسم تا كنون شناسايي شده است : كرم حلقوي كانوهاربيديس الگانس، دروزوفيلا ملانوگاسترو تينا سوليوم. در اين تحقيق ما با استفاده از توالي m RNA اكينوكوكوس گرانولوسوس موجود در بانك ژن دو پرايمر براي بخشي از ژن پاراميوسين در اكينوكوكوس گرانولوسوس طراحي كرديم. بخشي از ژن پاراميوسين اكينوكوكوس با استفاده از پرايمر هاي طراحي شده، تكثير شد و محصول PCR ها از روي ژل تخليص شدند و سپس داخل وكتور PTz57-T كلون شدند و براي تكثير به سلول هاي α DH5 انتقال يافتند. DNA كلون شده توالي يابي شد و با استفاده از نرم افزار blast آناليز شد و با ساير توالي هاي موجود در بانك ژن مقايسه شد.اين بخش از ژن پاراميوسين كه تكثير شد داراي 2005 جفت نوكلئوتيد طول ميباشد كه ما براي اولين بار آن را گزارش نموديم و تا كنون گزارشي از آن نشده است. آناليز اين بخش از ژن حضور 3 اينترون با طول هاي 180 و 75 و 357 جفت باز در قطعه forward و 2 اينترون با طول هاي 456 و 284 جفت باز در قطعه reverse را تائيد كرد. از آناليز قطعه سكانس شده با پرايمر forward يك قطعه با طول 1055 جفت باز با 3 اينترون حاصل شد كه اينترون شماره 2 آن در ژن پاراميوسين تنياسوليوم حضور دارد از آناليز قطعه سكانس شده با پرايمر reverse يك قطعه با طول 950 جفت باز با 2 اينترون حاصل شد كه فقط بخشهاي كوچكي از اينترون شماره 1 آن در ژن پاراميوسين تنيا سوليوم حضور دارد ( حدود 85 جفت باز) نكته قابل توجه اين است كه تا كنون گزارشي از اين اينترون ها در بانك ژن ثبت نشده است.

24/06/95

كشت كار، زهرا

34350